El objetivo de este estudio fue comparar el rendimiento de la prueba de sensibilidad para bacilos gram negativos realizada directamente desde el frasco de hemocultivo (PSDF) con el que se obtuvo a partir de un subcultivo del mismo con incubación corta de 3 h (SCIC), ambos con Vitek 2C. Se realizó un estudio prospectivo, observacional, que incluyó 80 episodios monomicrobianos de bacteriemia por bacilos gram negativos. La concordancia categórica y la esencial con respecto al método de referencia fueron del 98,8% y 98,8% para PSDF y del 98,9% y 98,9% (p>0,05) respectivamente para SCIC. La mediana de tiempo para obtener un resultado por PSDF y por SCIC fue de 9,4 h (p>0,05). Ambos métodos son confiables y comparables en términos de rendimiento y de tiempo para obtención de resultados, aunque para SCIC hay que sumar 3 h de incubación de los medios de cultivo sólidos.