La neumocistosis (PCP) pulmonar es una grave enfermedad respiratoria que afecta a individuos con serias deficiencias del sistema inmune, particularmente aquellos con sida.
El diagnóstico, ante la falta de signos y síntomas patognomónicos y la imposibilidad de realizar el aislamiento por cultivo de su agente causal, Pneumocystis jirovecii, puede intentarse mediante la microscopía, ya sea en fresco o previa coloración, de preparaciones realizadas con concentrados por centrifugación de secreciones respiratorias obtenidas por lavado broncoalveolar.
La microscopia en fresco revela la presencia de exudados espumosos (Fig. 1) provenientes del interior de los alvéolos pulmonares de los pacientes con PCP y permite un diagnóstico confiable. Esta metodología, que requiere de un observador experimentado en el reconocimiento de estas estructuras, es económica y rápida, útil en laboratorios con escasos recursos y que atienden a pacientes con sida con inmunosupresión avanzada.
La aplicación de la coloración de Giemsa, disponible en laboratorios de baja complejidad, permite la visualización en preparaciones fijadas de cuerpos espumosos y ocasionalmente de ascos (quistes) y ascosporos (cuerpos intraquísticos), tal como se observa en las Figuras 2 y 3. Las tinciones de Grocott (Fig. 4), azul de toluidina O y Gram- Weigert colorean los ascos del hongo, ubicados por lo general dentro de los cuerpos espumosos.
El empleo de fluorocromos permite la visualización de ascos y la inmunofluorescencia directa con anticuerpos monoclonales permite observar tanto ascos como ascosporos, pero ambos procedimientos requieren de un microscopio de fluorescencia, no siempre disponible.
Se han desarrollado técnicas moleculares basadas en la reacción en cadena de la polimerasa (PCR) que superan la sensibilidad de la microscopía en las secreciones respiratorias. La PCR en tiempo real es un formato adecuado para un diagnóstico cuantitativo y se ha usado para diferenciar enfermedad activa (carga fúngica elevada) del transporte/colonización (carga fúngica baja) del hongo en las vías respiratorias.
Los dosajes de biomarcadores sanguíneos tales como el (1-3)-β-D-glucano, el antígeno Krebs von den Lungen-6 (KL 6), la enzima lactato deshidrogenasa (LDH) y la S-adenosilmetionina, pueden también emplearse para el diagnóstico de la PCP.
Dr. AMADEO JAVIER BAVA
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